PHASiFY MAX cfDNA 提取试剂盒
PHASiFY MAX cfDNA 提取试剂盒（CE, NMPA认证）专门用于分离并浓缩血浆中的游离核酸片段(cfDNA)，和目前使用固相提取技术的行业金标产品相比，回收率有显著提升。
- 仅供体外检测之用
产品优势
- 产量更多：和固相提取技术相比，cfDNA的回收率 高达数倍
- 浓度更高：灵活调整最终洗脱体积，可以低至5 μL
- 操作简单：无需使用专业设备，如磁力架和真空泵等
产品规格
| 应用 | ddPCR, PCR, real-time PCR, NGS, 及其他 | |
|---|---|---|
| 样本类型 | 血浆 | |
| 操作时长 | ~180 分钟 | |
| 输入样本量 | 1 mL, 2 mL | |
| 洗脱体积 | 5 µL - 150µL | |
| 保质期稳定性 | 12 月 | |
| 产品用途 | 仅供体外检测使用 | |
| 操作 | 手动 | |
| 运输条件 | 室温 | |
| 储存条件 | 常温产品盒：储存在 15-30°C 冷藏盒：储存在 4°C |
图 1 - 提高循环肿瘤 DNA (ctDNA) 的产量
分别使用PHASiFY MAX 和Qiagen QIAamp 从 1 mL 癌症患者血浆样本中提取的总DNA回收率（利用Quant-iT™ PicoGreen™ dsDNA Assay Kit来测定；n=89)。 数据显示，PHASiFY MAX 提取的总DNA回收率是Qiagen QIAamp的3.8倍 (p-value <0.0001 Wilcoxon Signed-Rank)。 以上数据排除了2个离群值，分别显示PHASIFY™ MAX 的总DNA回收率对比Qiagen QIAamp提升了209倍及800倍。
图 2 – 检测到更多的突变基因
使用PHASiFY MAX游离核酸提取试剂盒可在13个样本中检测到Qiagen QIAamp未能检测到的突变基因。
图 3 – 对于指定片段范围的cfDNA可获得更高的回收率
使用PHASiFY MAX 游离核酸提取试剂盒和Qiagen QIAamp从1 mL 健康血浆样本中提取cfDNA，并利用Agilent Bioanalyzer 2100来分析提取的DNA。注: 于 35 bp 和 10,380 bp 显示的数据是内标物的讯号。
常见问题
如果血浆输入量少于试剂盒上标明的体积，我们建议在操作步骤1之前，先添加 1x PBS (pH 7.4) 使样本体积达到指示体积。但是，我们不建议使用浓度低于 80% v/v 的血浆
过高样本输入体积可能会破坏相位形成。我们建议使用试剂盒上标明的血浆输入体积。
在可控的条件下，使用1 mL 血浆输入试剂盒大约可以得到800-860 μL的下相溶液；使用2 mL 血浆输入试剂盒大约可以得到900-950 μL的下相溶液，无论多少，我们建议在步骤 5 中将所有下相溶液全部提取。
这将取决于您提取的 DNA 的下游应用。有可能任何错误液相的转移都会影响您的检测结果。对于大部分下游检测应用，我们发现转移少量（<10% 体积）错误液相不会对检测结果产生明显的影响。但是，在第 7 步中如果转移过多的下相溶液会影响片段大小的筛选结果。 我们建议在所有情况下都避免转移错误的液相溶液。
我们建议仅转移规定数量的红色上相溶液。转移过多的上相溶液可能会影响片段尺寸筛选的结果，不能很好地去除不良的大片段。我们建议您提取规定体积的上相溶液。
您可以在使用70%的乙醇洗脱 之前，先加入 40% 异丙醇进行洗脱（即重复步骤 15 和 16）以增加样品的纯度。请注意，额外的洗脱步骤可能会降低 DNA 回收率/产量。
