PHASiFY MAX cfDNA 提取試劑盒
PHASiFY MAX cfDNA 提取試劑盒（CE, NMPA認證）專門用於分離並濃縮血漿中的游離核酸片段(cfDNA)，和目前使用固相提取技術的行業金標產品相比，回收率有顯著提升。
- 僅供體外檢測之用
產品優勢
- 產量更多：和固相提取技術相比，cfDNA的回收率 高達數倍
- 濃度更高：靈活調整最終洗脫體積，可以低至5 μL
- 操作簡單：無需使用專業設備，如磁力架和真空泵等
產品規格
| 應用 | ddPCR, PCR, real-time PCR, NGS, 及其他 | |
|---|---|---|
| 樣本類型 | 血漿 | |
| 操作時長 | ~180 分鐘 | |
| 輸入樣本量 | 1 mL, 2 mL | |
| 洗脫體積 | 5 µL - 150µL | |
| 保質期穩定性 | 12 月 | |
| 產品用途 | 僅供體外檢測使用 | |
| 操作 | 手動 | |
| 運輸條件 | 室溫 | |
| 儲存條件 | 常溫產品盒：儲存在 15-30°C 冷藏盒：儲存在 4°C |
圖 1 - 提高循環腫瘤 DNA (ctDNA) 的產量
分别使用PHASiFY MAX 和Qiagen QIAamp 从 1 mL 癌症患者血浆样本中提取的总DNA回收率（利用Quant-iT™ PicoGreen™ dsDNA Assay Kit来测定；n=89)。 数据显示，PHASiFY MAX 提取的总DNA回收率是Qiagen QIAamp的3.8倍 (p-value <0.0001 Wilcoxon Signed-Rank)。 以上数据排除了2个离群值，分别显示PHASiFY MAX 的总DNA回收率对比Qiagen QIAamp提升了209倍及800倍。
圖 2 – 檢測到更多的突變基因
使用PHASiFY MAX游離核酸提取試劑盒可在13個樣本中檢測到Qiagen QIAamp未能檢測到的突變基因。
圖 3 – 對於指定片段範圍的cfDNA可獲得更高的回收率
使用PHASiFY MAX 遊離核酸提取試劑盒和Qiagen QIAamp從1 mL 健康血漿樣本中提取cfDNA，並利用Agilent Bioanalyzer 2100來分析提取的DNA。注: 於 35 bp 和 10,380 bp 顯示的數據是內標物的訊號。
常見問題
如果血漿輸入量少於試劑盒上標明的體積，我們建議在操作步驟1之前，先添加 1x PBS (pH 7.4) 使樣本體積達到指示體積。但是，我們不建議使用濃度低於 80% v/v 的血漿
過高樣本輸入體積可能會破壞相位形成。我們建議使用試劑盒上標明的血漿輸入體積。
在可控的條件下，使用1 mL 血漿輸入試劑盒大約可以得到800-860 μL的下相溶液；使用2 mL 血漿輸入試劑盒大約可以得到900-950 μL的下相溶液，無論多少，我們建議在步驟 5 中將所有下相溶液全部提取。
這將取決於您提取的 DNA 的下游應用。有可能任何錯誤液相的轉移都會影響您的檢測結果。對於大部分下游檢測應用，我們發現轉移少量（<10% 體積）錯誤液相不會對檢測結果產生明顯的影響。但是，在第 7 步中如果轉移過多的下相溶液會影響片段大小的篩選結果。 我們建議在所有情況下都避免轉移錯誤的液相溶液。
我們建議僅轉移規定數量的紅色上相溶液。轉移過多的上相溶液可能會影響片段尺寸篩選的結果，不能很好地去除不良的大片段。我們建議您提取規定體積的上相溶液。
您可以在使用70%的乙醇洗脫 之前，先加入 40% 異丙醇進行洗脫（即重複步驟 15 和 16）以增加樣品的純度。請注意，額外的洗脫步驟可能會降低 DNA 回收率/產量。
